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設計引物時(shí)同源臂怎么加

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用PCR擴的時(shí)候就把同源重組片段引入,vector酶切后 5'端選15nt,3'端選15nt分別加到正向引物和反向引物上,就做成了同源臂。?

同源序列是指在同一物種不同個(gè)體間或不同物種間相同或相似的DNA序列,而同源臂是指一段同源序列,類(lèi)似于tRNA氨基酸臂的結構,所謂臂,指的是手臂樣結構。

弓|物是人工合成的兩個(gè)寡核苷酸序列:一個(gè)引物與靶區域-端的一條DNA模板鏈互補,另一個(gè)弓|物與靶區域另一端的另-條DNA模板鏈互補,其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點(diǎn),核酸聚合酶可由其3端開(kāi)始合成新的核酸鏈。

好的引物會(huì )讓PCR實(shí)驗成功一半,因而,引物設計一直都是PCR非常重要的環(huán)節。PrimerPremier5和Oligo7這兩款軟件想必是備受科研汪們推崇的引物設計軟件。

設計引物時(shí)同源臂怎么加

引物設計簡(jiǎn)介:

引物設計是一小段單鏈DNA或RNA,作為DNA復制的起始點(diǎn),在核酸合成反應時(shí),作為每個(gè)多核苷酸鏈進(jìn)行延伸的出發(fā)點(diǎn)而起作用的多核苷酸鏈,在引物的3′-OH上,核苷酸以二酯鏈形式進(jìn)行合成,因此引物的3′-OH,必須是游離的。

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